Как измерение оптической плотности помогает определять концентрацию белков и нуклеиновых кислот?

Измерение оптической плотности помогает определять концентрацию белков и нуклеиновых кислот благодаря способности этих веществ поглощать свет в ультрафиолетовой области спектра. kpfu.ru

Для нуклеиновых кислот используют ультрафиолетовое излучение с длиной волны 260 нм. vk.com ru.wikipedia.org Часть света проходит через образец, а часть поглощается нуклеиновой кислотой. en.wikipedia.org Чем больше света поглощено, тем выше концентрация нуклеиновой кислоты в образце. ru.wikipedia.org Это связано с законом Бугера — Ламберта — Бера, который гласит, что оптическая плотность раствора прямо пропорциональна концентрации поглощающего вещества. vk.com

Для белков обычно применяют измерения интенсивности поглощения света при длине волны 280 нм. kpfu.ru Это обусловлено присутствием в белке ароматических аминокислот. kpfu.ru Хотя количество этих аминокислот в разных белках различно и, следовательно, интенсивность неодинакова, есть правило: в кювете толщиной 1 см у раствора, содержащего 1 мг «усредненного» белка в 1 мл, оптическая плотность равна 1 при длине волны 280 нм. kpfu.ru

Кроме того, соотношение оптической плотности при 260 и 280 нм (A260/280) используют для оценки чистоты нуклеиновых кислот, так как белки (в частности, ароматические аминокислоты) поглощают свет при 280 нм. en.wikipedia.org ru.wikipedia.org