Хеликазы разрывают водородные связи между двумя цепями ДНК, используя энергию гидролиза нуклеотидтрифосфатов (АТФ, ГТФ). 35

Процесс происходит в несколько этапов: 3

1. Связывание с определёнными участками ДНК (репликационными вилками). 3
2. Движение вдоль ДНК. 3 Хеликаза разрывает водородные связи между нуклеотидами в двойной спирали. 3
3. Отделение двух цепей ДНК. 3 Они становятся доступными для синтеза новых комплементарных цепей. 3

Движение фермента вдоль цепи нуклеиновой кислоты может происходить как в направлении 5' → 3', так и в направлении 3' → 5', в зависимости от конкретной хеликазы. 5