Особенности приготовления мясо-пептонного агара:
- Основой для приготовления является мясная вода, к которой прибавляют 1% порошкообразного пептона и 0,5% поваренной соли и растворяют при подогревании. 2
- Для полного осаждения белков жидкость кипятят, постоянно помешивая, в течение 30 минут или выдерживают около 20 минут в автоклаве при температуре 115 градусов. 2
- После этого фильтруют через 3–4 слоя фильтровальной бумаги, предварительно смоченной дистиллированной водой, устанавливают реакцию среды (pH не ниже 8,2–8,4). 2
- Добавляют 0,5–2% (в зависимости от необходимой степени плотности среды) размельчённого и промытого агара, после чего жидкость нагревают, медленно помешивая, до полного растворения агара. 2
- При упаривании добавляют горячую дистиллированную воду до первоначального объёма. 2
- После растворения агара проверяют реакцию среды, окончательно устанавливают требуемую величину pH (обычно 7,2–7,3) и, если необходимо, фильтруют в горячем состоянии через ватно-марлевый фильтр. 2
- Фильтрат разливают в пробирки, флаконы, колбы или матрасы и стерилизуют в автоклаве при 120° в течение 20–30 минут. 2 После стерилизации среда, остывая, уплотняется. 2
Особенности использования мясо-пептонного агара:
- Перед использованием с бутылки с мясо-пептонным агаром снимают алюминиевый колпачок, заменяют резиновую пробку на ватно-марлевую. 1
- Выдерживают бутылку с мясо-пептонным агаром в кипящей водяной бане до полного расплавления студня, охлаждают до температуры 45–50 °С и разливают в стерильные чашки Петри слоем 4–5 мм. 1
- После полного застывания чашки со средой подсушивают при температуре 37 °С в открытом виде перевёрнутыми в течение 45–60 минут. 1
- Для контроля стерильности пробирки или чашки с питательным агаром выдерживают в термостате при температуре 37 °С в течение 24–1 часов. 4
Мясо-пептонный агар предназначен для культивирования широкого спектра микроорганизмов, включая энтеробактерии, синегнойную палочку, стафилококки. 4 При необходимости может быть обогащён кровью, сывороткой крови, углеводами, солями. 14