Какие существуют методы замораживания тканей для микроскопических исследований?

Некоторые методы замораживания тканей для микроскопических исследований:

1. Замороженный срез. 12 Образец ткани быстро замораживают с помощью криостата — устройства, поддерживающего очень низкую температуру. 1 Процесс быстрого замораживания сохраняет структуру ткани без необходимости обычных процедур фиксации и встраивания. 1 Затем блок замороженной ткани разрезают на очень тонкие кусочки с помощью микротома внутри криостата. 1 После этого тонкие срезы тканей помещают на предметные стёкла, окрашивают красителями для выделения клеточных структур, а затем покрывают покровным стеклом. 1
2. Метод замораживания-скалывания. 34 С помощью этого метода исследуют тончайшие детали строения клетки, при этом получается объёмное изображение в трансмиссионном электронном микроскопе. 3 Клетки замораживают очень быстро при температуре жидкого азота (-196 °С). 3 При таком мгновенном замораживании кристаллы льда не успевают образоваться, и клетка не испытывает деформаций. 3 Замороженный блок раскалывают лезвием ножа, затем, обычно в вакуумной камере, избыток льда удаляют возгонкой. 3 После травления более резко обозначается рельеф в плоскости скола. 3 Полученный образец оттеняется, то есть на поверхность образца напыляется тонкий слой тяжёлых металлов. 3
3. Метод замораживания-скалывания-травления (ЗСТ). 4 Принцип метода прост: замороженные образцы тканей раскалывают, на обнажившиеся поверхности напыляют металл, полученную таким образом металлическую реплику очищают и изучают в просвечивающем электронном микроскопе. 4