Некоторые основные проблемы при работе с гелями SDS-PAGE и способы их решения:

• Искажение полос. 1 Возникает из-за неравномерной загрузки образцов, избыточного количества образцов, неправильного состава буфера и ионной концентрации, длительного времени работы геля или неравномерного распределения тока по гелю. 1 Чтобы решить проблему, нужно последовательно загружать образцы, избегать перегрузки лунок, внимательно контролировать время и напряжение работы геля, обеспечивать равномерное распределение буфера и тока. 1
• Неполное разделение белков. 1 Может быть вызвано недостаточным временем работы геля, неправильной концентрацией акриламида или неправильным приготовлением буфера. 1 Чтобы улучшить разделение, нужно позволить гелю работать достаточное время, отрегулировать концентрацию акриламида в зависимости от размера белка, убедиться, что состав буфера и ионная концентрация подходят для эффективной миграции белка. 1
• Проблемы полимеризации геля. 1 К ним относятся непараллельные полосы, утечка образцов и плохое разделение. 1 Часто возникают из-за неправильного приготовления геля. 1 Чтобы решить проблему, нужно обеспечить полную полимеризацию, бережно обращаться с лунками и регулировать концентрацию акриламида в зависимости от размера белка. 1
• Слишком быстрое перемещение образцов. 3 Может быть вызвано слишком разбавленным буфером или работой геля под очень высоким напряжением. 3 Чтобы решить проблему, нужно использовать буфер с правильной концентрацией соли и работать с гелем под рекомендуемым напряжением, указанным в протоколе. 23
• Образцы выходят из лунок до начала работы геля. 3 Это может произойти из-за задержки между загрузкой образцов и применением электрического тока к гелю. 3 Чтобы решить проблему, нужно загружать и запускать гель почти одновременно, стараясь минимизировать время между загрузкой первого образца и началом работы. 3