Последовательность этапов выделения ДНК: 12

1. Разрушение мембран клеток. 12 Для этого используют лизирующий буфер, содержащий поверхностно-активные вещества (ПАВ) и специальный фермент — протеиназу К. 1 ПАВ разрушают клеточные мембраны, протеиназа расщепляет связывающие ДНК белки, а буферный компонент поддерживает pH на оптимальном для ДНК уровне. 1
2. Очистка ДНК от примесей. 12 С помощью центрифугирования раствор фильтруют через силикатную мембрану на специальных колонках. 1 ДНК обратимо связывается с мембраной, в то время как остальные органические компоненты клетки проходят сквозь неё. 1 Мембрану со связанной ДНК несколько раз промывают изопропиловым и/или этиловым спиртом, чтобы окончательно избавиться от примесей. 1
3. Растворение ДНК в буфере для хранения. 2 Связанную с мембраной ДНК отмывают буфером для элюции (элюцией называют процесс выведения в раствор адсорбированного вещества). 2 Растворенная в буфере ДНК может храниться при −20°С в течение нескольких лет. 2