В каких случаях спектрофотометрический метод дает наименее точные результаты?

Некоторые ситуации, в которых спектрофотометрический метод может давать менее точные результаты:

• Разбавление растворов малоустойчивых окрашенных соединений. 2 Одна из причин отклонений от закона светопоглощения — диссоциация светопоглощающего соединения и влияние сопряжённых реакций, протекающих в водном растворе. 2
• Флуоресценция анализируемого вещества. 2 Попадание испускаемого раствором флуоресцентного потока на фотоэлемент увеличивает интенсивность прошедшего через раствор света, что снижает экспериментально определяемую оптическую плотность. 2
• Немонохроматичность падающего на образец светового потока. 24 В реальных спектрофотометрах из выходной щели выходит пучок света с некоторым интервалом длин волн, который определяется шириной выходной щели и дисперсией монохроматора. 2
• Большое число определяемых компонентов. 1 Погрешность определения резко увеличивается при уменьшении относительного содержания компонента. 1
• Состав белков сильно варьируется. 5 Например, метод оценки концентрации белка по измерению внешнего вида при длине волны 280 нм не очень точен, поскольку состав белков может сильно отличаться. 5

На точность результатов анализа также влияют различные химические факторы, связанные с полнотой и условиями протекания фотометрической реакции, концентрацией окрашенных и других реактивов, их устойчивостью и т. д.. 2