Особенности трансфекции бактериальных клеток без клеточной стенки заключаются в том, что для облегчения проникновения ДНК в клетку необходимо локально разрушить клеточную стенку. 2
Некоторые методы, которые используют для этого:
- Обработка раствором СаСl2. 2 Происходит локальное разрушение клеточной стенки, что позволяет достичь максимальной частоты трансформации. 2
- Использование протопластов и сферопластов. 2 В результате мембрана становится более доступной. 2
- Обработка клеток полиэтиленгликолем. 2 Происходит частичное повреждение цитоплазматической мембраны, что также увеличивает частоту трансформации. 2
- Электропорация. 2 Физический метод, который увеличивает мембранную проницаемость. 2 Смесь клеток и ДНК подвергают электрическому разряду, в результате в мембране образуются каналы, и через них внутрь клетки проникает ДНК. 2
Трансфекция бактериальных клеток без клеточной стенки осуществляется с помощью вирусной (фаговой) нуклеиновой кислоты. 3