В чем заключается принцип работы метода инвертированной ПЦР?

Принцип работы метода инвертированной ПЦР заключается в том, что перед проведением ПЦР с помощью серии ферментативных реакций как бы приклеивают известные фрагменты на концы неизвестного, чтобы можно было его амплифицировать. elearning.volgmed.ru

Этот вариант используют, когда известна последовательность (сиквенс) какого-то участка ДНК, но нужно амплифицировать вовсе не его, а то неизвестное, что его окружает. elearning.volgmed.ru Например, необходимо узнать, в какое место генома встроился вирус с известным сиквенсом. biomolecula.ru

Инвертированная ПЦР состоит из нескольких этапов: biomolecula.ru

1. ДНК, где есть участок с известной последовательностью, разрезают крупнощепящей рестриктазой на фрагменты длиной несколько т.п.н.. biomolecula.ru
2. Ферментом лигазой полученные фрагменты закольцовывают. biomolecula.ru
3. Используя праймеры к известной последовательности, но ориентированные кнаружи от неё, амплифицируют ту самую, неизвестную, которую потом можно, например, секвенировать. biomolecula.ru