Метод трансфекции при работе с рекомбинантными плазмидами заключается в трансформации прокариотических клеток рекомбинантной плазмидной ДНК. helicon.ru Для этого используют способ, в котором сочетаются методы химической и физической трансфекции. helicon.ru
Процесс проходит по следующему сценарию: biomolecula.ru
- Вектор соединяют с переносчиком, у которого нет проблем с проникновением через мембрану. biomolecula.ru
- Получившийся комплекс проглатывается клеткой и оказывается в цитоплазме. biomolecula.ru
- В цитоплазме комплекс разваливается, и вектор высвобождается. biomolecula.ru
- Вектор проникает в ядро и выполняет своё предназначение. biomolecula.ru
Некоторые методы трансфекции:
- Микроинъекции. helicon.ru Нуклеиновые кислоты напрямую доставляются внутрь клетки (и даже внутрь отдельных органелл, например, ядра) с помощью специальной капиллярной иглы. helicon.ru
- Импалефекция. helicon.ru Вместо одной капиллярной иглы используется платформа с расположенными на ней множественными «наноиглами» — углеродными нанотрубками и другими наноматериалами, на поверхности которых прикрепляются нуклеиновые кислоты. helicon.ru
- Электропорация. helicon.ru Специальный прибор — электропоратор — создаёт электрическое напряжение для кратковременного повышения проницаемости клеточной мембраны за счёт образования поровых отверстий, через которые может проникнуть экзогенная нуклеиновая кислота. helicon.ru
- Липофекция, или липосомная трансфекция. helicon.ru В основе метода лежит свойство катионных липидов образовывать в растворе сферообразные везикулы — липосомы. helicon.ru