Метод трансфекции при работе с рекомбинантными плазмидами заключается в трансформации прокариотических клеток рекомбинантной плазмидной ДНК. 1 Для этого используют способ, в котором сочетаются методы химической и физической трансфекции. 1
Процесс проходит по следующему сценарию: 3
- Вектор соединяют с переносчиком, у которого нет проблем с проникновением через мембрану. 3
- Получившийся комплекс проглатывается клеткой и оказывается в цитоплазме. 3
- В цитоплазме комплекс разваливается, и вектор высвобождается. 3
- Вектор проникает в ядро и выполняет своё предназначение. 3
Некоторые методы трансфекции:
- Микроинъекции. 1 Нуклеиновые кислоты напрямую доставляются внутрь клетки (и даже внутрь отдельных органелл, например, ядра) с помощью специальной капиллярной иглы. 1
- Импалефекция. 1 Вместо одной капиллярной иглы используется платформа с расположенными на ней множественными «наноиглами» — углеродными нанотрубками и другими наноматериалами, на поверхности которых прикрепляются нуклеиновые кислоты. 1
- Электропорация. 1 Специальный прибор — электропоратор — создаёт электрическое напряжение для кратковременного повышения проницаемости клеточной мембраны за счёт образования поровых отверстий, через которые может проникнуть экзогенная нуклеиновая кислота. 1
- Липофекция, или липосомная трансфекция. 1 В основе метода лежит свойство катионных липидов образовывать в растворе сферообразные везикулы — липосомы. 1