Метод секвенирования ДНК заключается в определении последовательности нуклеотидов в цепочке ДНК. 3
Общая схема метода: 1
- Создание библиотеки случайных последовательностей ДНК. 1 Их можно будет сшить с общедоступными адаптерными последовательностями. 1
- Создание ампликонов с помощью ПЦР, которые будут использованы как образцы. 1
- Определение первичной структуры всех фрагментов. 1
Некоторые этапы процесса:
- Денатурация ДНК. 2 Разрушение водородных связей, чтобы получить отдельные цепочки. 2
- Присоединение праймеров. 2 Это короткие фрагменты ДНК, к которым может присоединиться ДНК-полимераза для репликации нитей. 2
- Копирование полимеразой дезоксирибонуклеиновой кислоты. 2 Процесс достигается за счёт изменения температуры смеси из праймеров, ДНК и полимеразы. 2
- Повторение процесса. 2 На выходе получается множество копий участков одной и той же дезоксирибонуклеиновой кислоты. 2
Существует множество различных методов секвенирования, которые используются для работы с разными типами образцов и задачами. 4