Метод секвенирования по Сэнгеру (также известен как метод обрыва цепи) заключается в определении последовательности нуклеотидов в составе ДНК (молекулы, несущей генетическую информацию). 5
Процесс проходит в несколько этапов: 2
- К исследуемой цепи ДНК добавляют праймер, небольшую одноцепочечную молекулу ДНК, комплементарную началу участка, который нужно отсеквенировать. 3
- Добавляют нуклеотиды (аденин, тимин, гуанин и цитозин), которые будут присоединяться к нити ДНК и полимеразе. 2
- Нуклеотиды «включаются» в растущую цепь ДНК, в результате чего получаются фрагменты разной длины. 2
- Когда нуклеотиды встраиваются в синтезируемую цепь ДНК, дальше она расти не может. 2
- По месту её обрыва можно определить последнюю букву в изучаемом фрагменте ДНК. 2
Метод позволяет прочитывать последовательности длиной до 1 000 пар нуклеотидов и обычно применяется для анализа небольших участков генома. 5
Метод был разработан английским учёным Фредериком Сэнгером в 1977 году и за своё открытие учёный был удостоен Нобелевской премии по химии. 35