В чём заключается метод молекулярной гибридизации in situ?

Метод молекулярной гибридизации in situ (ISH) заключается в выявлении генетического материала, такого как ДНК или РНК, в клетках или тканях. www.mypathologyreport.ca

Он основан на способности ДНК или РНК образовывать устойчивые гибридные молекулы с ДНК/РНК-зондами непосредственно на препаратах фиксированных хромосом и интерфазных ядер. www.ld.ru

Принцип метода заключается в использовании небольшого помеченного фрагмента генетического материала (зонда нуклеиновой кислоты), комплементарного (противоположного) генетическому материалу-мишени. www.mypathologyreport.ca Зонд можно комбинировать с различными типами меток, такими как флуоресцентные красители, радиоактивные изотопы или ферменты, которые позволяют увидеть зонд внутри клеток. www.mypathologyreport.ca

Для проведения ISH образец ткани сначала фиксируют и обрабатывают, чтобы сохранить его структуру и подготовить к гибридизации. www.mypathologyreport.ca Затем ткань инкубируют с меченым зондом, который прикрепляется (гибридизуется) к целевому генетическому материалу, если он присутствует. www.mypathologyreport.ca Затем оставшийся зонд смывается, а оставшиеся комбинации зонд-мишень обнаруживаются одним из нескольких методов. www.mypathologyreport.ca