Суть метода окраски по Граму в микробиологии — визуальное разделение бактерий на две группы: грамположительные и грамотрицательные. pikabu.ru
Процесс окрашивания включает следующие этапы: dzen.ru
- К клеткам бактерий на предметном стекле добавляют фиолетовый краситель (генциан или метилвиолет). dzen.ru В результате этого все бактерии получают фиолетовую окраску и различить их невозможно. dzen.ru
- Добавляют раствор Люголя, в котором содержится йод, фиксирующий фиолетовую окраску у грамположительных бактерий. dzen.ru
- Промывают препарат в спирте. dzen.ru После промывки грамположительные бактерии сохраняются фиолетовыми, так как их окрашивание предварительно зафиксировали, а грамотрицательные бактерии обесцвечиваются. dzen.ru
- Добавляют розовый краситель (фуксин), который подкрашивает выцветшие грамотрицательные бактерии, чтобы их хорошо рассмотреть во время микроскопии. dzen.ru
Различие в окрашивании зависит от строения клеточной стенки бактерий: dzen.ru
- У грамположительных бактерий толстый муреиновый слой, с компонентами которого и связывается фиолетовый краситель. dzen.ru
- У грамотрицательных бактерий муреиновый слой гораздо тоньше, да ещё и поверх него располагается наружная мембрана. dzen.ru Наружная мембрана мешает окрашиванию и так тонкой клеточной стенки, потому она и не способна связаться с фиолетовым красителем. dzen.ru