Суть метода окраски по Граму в микробиологии — визуальное разделение бактерий на две группы: грамположительные и грамотрицательные. 2

Процесс окрашивания включает следующие этапы: 5

1. К клеткам бактерий на предметном стекле добавляют фиолетовый краситель (генциан или метилвиолет). 5 В результате этого все бактерии получают фиолетовую окраску и различить их невозможно. 5
2. Добавляют раствор Люголя, в котором содержится йод, фиксирующий фиолетовую окраску у грамположительных бактерий. 5
3. Промывают препарат в спирте. 5 После промывки грамположительные бактерии сохраняются фиолетовыми, так как их окрашивание предварительно зафиксировали, а грамотрицательные бактерии обесцвечиваются. 5
4. Добавляют розовый краситель (фуксин), который подкрашивает выцветшие грамотрицательные бактерии, чтобы их хорошо рассмотреть во время микроскопии. 5

Различие в окрашивании зависит от строения клеточной стенки бактерий: 5

• У грамположительных бактерий толстый муреиновый слой, с компонентами которого и связывается фиолетовый краситель. 5
• У грамотрицательных бактерий муреиновый слой гораздо тоньше, да ещё и поверх него располагается наружная мембрана. 5 Наружная мембрана мешает окрашиванию и так тонкой клеточной стенки, потому она и не способна связаться с фиолетовым красителем. 5