В чём преимущества и недостатки использования T7 промотора для экспрессии рекомбинантных белков?

Некоторые преимущества использования T7-промотора для экспрессии рекомбинантных белков:

• Высокий уровень экспрессии. microbialcellfactories.biomedcentral.com www.ibch.ru В некоторых случаях система позволяет получить экспрессию целевого белка, достигающую 50% от общего производства клеточного белка. microbialcellfactories.biomedcentral.com
• Возможность оптимизации экспрессии. microbialcellfactories.biomedcentral.com Это позволяет получать высокие выходы целевого белка в крупномасштабных культурах. microbialcellfactories.biomedcentral.com
• Сокращение временных лабораторных процедур. microbialcellfactories.biomedcentral.com Система позволяет исключить мелкомасштабную тестовую экспрессию, что особенно полезно при тестировании большого количества генетических конструкций на экспрессию целевого белка. microbialcellfactories.biomedcentral.com
• Снижение количества белковых молекул с неправильной укладкой. applied-research.ru Это свойство даёт преимущество при продукции сложных белковых молекул, склонных к агрегации. applied-research.ru

Некоторые недостатки использования T7-промотора для экспрессии рекомбинантных белков:

• Постепенное снижение уровней экспрессии. microbialcellfactories.biomedcentral.com После нескольких (3–5) субкультур уровни индуцированной экспрессии могут быть сопоставимы с базальными уровнями экспрессии, что приводит к более низкому целевому выходу белка. microbialcellfactories.biomedcentral.com
• Базальная экспрессия Т7 РНК-полимеразы. www.ibch.ru Она может привести к гибели клеток в случае синтеза токсичных белков. www.ibch.ru
• Трудность достижения дозозависимой экспрессии. www.ibch.ru
• Образование нерастворимых белковых агрегатов. www.ibch.ru Это происходит из-за высокого уровня транскрипции. www.ibch.ru
• Малоприменимость для белков или пептидов, токсичных для клеток E. coli. www.ibch.ru
• Высокая стоимость и токсичность ИПТГ, используемого для индукции экспрессии, что ограничивает его использование в производстве. www.ibch.ru