Почему важно контролировать ход амплификации в каждой пробирке с реакционной смесью?

Контроль хода амплификации в каждой пробирке с реакционной смесью важен, потому что позволяет обеспечить достоверность результатов полимеразной цепной реакции (ПЦР). labtech.kz cyberleninka.ru

Некоторые причины, по которым необходим такой контроль:

• Технические ошибки. labtech.kz Например, можно забыть добавить какой-либо компонент или саму ДНК. labtech.kz Также возможно несоблюдение температурного режима хранения наборов реагентов или их частей, что влияет на результаты ПЦР. labtech.kz
• Примеси в препарате ДНК. www.mednovosti.by Они могут снижать эффективность реакции, а в некоторых случаях приводить к отсутствию специфических ампликонов даже при наличии искомого возбудителя. www.mednovosti.by
• Образование побочных продуктов реакции. 3uch.ru Это может значительно уменьшить чувствительность системы и затруднить или сделать невозможным учёт результатов при проведении электрофореза. 3uch.ru www.ibmc.msk.ru

Для контроля хода амплификации используют внутренний контроль — препарат ДНК, несхожий с ДНК искомого микроорганизма. cyberleninka.ru 3uch.ru Если ампликоны нужного размера не образовались, но не образовались и ампликоны внутреннего контроля, это может говорить о технологических нарушениях или наличии в образце нежелательных примесей. labtech.kz www.ibmc.msk.ru В таком случае результат реакции считается недостоверным. labtech.kz www.ibmc.msk.ru