Трёхиглые колюшки защищают свою территорию от других самцов, чтобы обеспечить безопасность гнезда и будущего потомства. 25
Самец остаётся при гнезде и ревниво оберегает его от врагов, отгоняя их от этого места и стараясь отвлечь от него внимание других, более опасных неприятелей, особенно крупных рыб. 2
Кроме того, защита территории помогает доминирующему самцу захватить лучший участок для устройства гнезда, что позволяет ему с большим успехом ухаживать за самками и мальками. 5