При измерении оптической плотности важно учитывать температуру и время инкубации, потому что несоблюдение этих параметров может привести к искажению результатов. 1

Влияние температуры: внесение в лунки планшета холодных реагентов может привести к получению неадекватных результатов, особенно в методиках с короткой инкубацией. 1 Это происходит из-за нарушения процесса установления равновесия в системе. 1 Однако если фотометрировать исследуемый раствор относительно холостого раствора, то влияние температуры на плотность раствора нивелируется (при одинаковой температуре исследуемого и холостого растворов). 4

Влияние времени инкубации: после смешивания реактива и образца начинается химическая реакция, которая сопровождается изменением оптической плотности. 2 По истечении времени инкубации, которое задаётся в методике, реакция прекращается, и изменение оптической плотности также прекращается. 2 Оптическая плотность становится более-менее постоянной величиной, пропорциональной концентрации искомого вещества. 2 В этот момент и производится измерение оптической плотности. 2

Таким образом, строгое соблюдение температурных и временных интервалов, рекомендованных производителем набора реагентов, является важным условием для получения точных результатов. 1