Каковы преимущества и недостатки различных методов молекулярного клонирования?

Некоторые методы молекулярного клонирования и их преимущества и недостатки:

• Традиционное клонирование. www.skygen.com Преимущества: бюджетный, универсальный метод, удобный для направленного клонирования. www.skygen.com Недостатки: возможны ограничения, связанные с наличием сайта рестрикции. www.skygen.com
• ПЦР-клонирование. www.skygen.com Преимущества: высокая эффективность трансфекции, быстрый протокол. www.skygen.com Недостатки: ограниченный выбор векторов, высокая стоимость, отсутствие контроля последовательности на стыке, сложности с реализацией направленного клонирования и клонированием нескольких фрагментов. www.skygen.com
• Бесшовное клонирование. www.skygen.com Преимущества: не зависит от нуклеотидной последовательности вставки, быстрая сборка мультифрагментных конструкций, совершенный контроль направленности сборки. www.skygen.com Недостатки: высокая стоимость, необходимость подбирать и заказывать уникальные праймеры для синтеза вставки. www.skygen.com
• Безлигазное клонирование. www.skygen.com Преимущества: бюджетный метод, совместим с большим выбором векторов. www.skygen.com Недостатки: сиквенс-зависимый метод клонирования. www.skygen.com
• Рекомбинантное клонирование. www.skygen.com Преимущества: быстрый протокол клонирования, высокая эффективность, универсальность, воспроизводимость результатов. www.skygen.com Недостатки: высокая стоимость, необходимость приобретать патентованные смеси ферментов. www.skygen.com
• TA-клонирование. genterra.ru Преимущества: простота и скорость получения рекомбинантной ДНК, подходит для клонирования в случае наличия внутреннего сайта рестрикции во вставке ДНК. genterra.ru Недостатки: целевая последовательность может быть вставлена в вектор как в прямой, так и в обратной ориентации, необходимость использования специализированных плазмид, несущих остаток тимина. genterra.ru

Каждый из методов молекулярного клонирования имеет свои особенности и находит применение в исследованиях и биотехнологии. genterra.ru