Каковы основные методы синтеза пептидов и белков в лаборатории?

Некоторые методы синтеза пептидов и белков в лаборатории:

• Технология рекомбинантной ДНК. 1 Широко используемый способ получения белка, но имеет ряд недостатков: возникают трудности с получением токсичных для клетки белков, невозможно получение коротких пептидов. 1
• Бесклеточная экспрессия белков. 1 Достигается путём объединения лизата клеток, который содержит все необходимые механизмы для синтеза белка, с экзогенным снабжением аминокислотами, нуклеотидами, солями и энергетическими ресурсами. 1
• Химический синтез. 14 Позволяет вводить в состав белков аминокислотные остатки, не встречающиеся в обычных белках. 4 Чаще химический синтез пептида проводят в направлении от C-конца к N-концу. 4
• Твердофазный пептидный синтез (SPPS). 2 Общепринятый метод получения синтетических пептидов в лабораторных условиях. 2 Позволяет быстро собирать пептидную цепь посредством последовательных реакций производных аминокислот на макроскопически нерастворимой в растворителе полимерной подложке. 2
• Ступенчатая элонгация. 2 Аминокислоты соединяются поэтапно по очереди, подходит для небольших пептидов, содержащих от 2 до 100 аминокислотных остатков. 2
• Конденсация фрагментов. 2 Пептидные фрагменты соединяются, этот метод лучше ступенчатого удлинения для синтеза сложных длинных пептидов. 2
• Химическое лигирование. 2 Незащищённые пептидные цепи вступают в хемоселективную реакцию в водном растворе, что позволяет получать более длинные пептидные цепи. 2