Каковы основные этапы проведения электрофореза ДНК?

Основные этапы проведения электрофореза ДНК:

1. Подготовка к проведению анализа. 1 На ровную поверхность устанавливают форму для заливки геля. 1 Агарозный гель застывает в течение 30–60 минут при температуре 18–25 °С. 1
2. Заполнение камеры для электрофореза буферным раствором. 12 Туда помещают пластинку с агарозным гелем и осторожно извлекают гребенку плавным движением вверх, избегая повреждения образовавшихся лунок. 1 Буферный раствор должен полностью покрыть пластинку с гелем слоем не менее 3–5 мм. 1
3. Смешивание проб. 1 Подготовленные пробы смешивают с буферным раствором для внесения в таком соотношении, чтобы в конечной пробе была рабочая (1х) концентрация буферного раствора. 1
4. Внесение проб в лунки агарозного геля. 1 Полученные растворы вносят в лунки агарозного геля под буферный раствор для электрофореза, камеру для электрофореза закрывают, электроды подсоединяют к источнику тока и включают прибор. 1
5. Отслеживание процесса электрофореза. 1 Процесс отслеживают по фронту красителя в геле (заряженного низкомолекулярного вещества, которое входит в состав буферного раствора для внесения). 1 Электрофорез останавливают при приближении красителя к концу пластинки. 1
6. Визуализация разделённых фрагментов. 12 Фрагменты ДНК разной длины визуализируют при помощи флюоресцентных красителей, специфично взаимодействующих с ДНК. 2 Например, агарозные гели обычно красят бромистым этидием, который интеркалирует между азотистыми основаниями дуплекса и флюоресцирует в УФ-лучах. 2
7. Анализ полученных результатов. 1 Проводят визуализацию разделённых фрагментов и анализ полученных результатов. 1 Возможно также извлечение фрагментов ДНК из геля для проведения дальнейших исследований. 1