Основные этапы определения N-концевой аминокислоты в белке:

1. Реакция с реагентом, который избирательно маркирует концевую аминокислоту. 4 Для этого используют, например, 2,4-динитрофторбензол или дансилхлорид. 24 В результате реакции свободная аминогруппа N-концевой аминокислоты арилируется или ацилируется. 2
2. Гидролиз белка. 24 В результате гидролиза освобождается N-концевая аминокислота, которая отличается по физико-химическим свойствам от остальных аминокислот, поэтому её легко отделить и идентифицировать. 2
3. Определение аминокислоты методом хроматографии и сравнения со стандартами. 4 Для этого используют, например, высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ), капиллярный электрофорез и масс-спектрометрию. 1