Процесс криоэлектронной микроскопии для получения изображений клеток включает несколько этапов: 3
- Подготовка образца. 1 Исследуемый раствор помещают на стандартную сетку для образцов с углеродной подложкой и большим количеством отверстий. 3 После удаления избытка раствора сетку быстро погружают в жидкий этан (минус 182 градуса Цельсия). 3 В результате на поверхности сетки и в отверстиях образуется тонкая плёнка аморфного льда с хаотично расположенными в них частицами. 3
- Получение изображения. 1 Образец ставят под электронный микроскоп и просвечивают пучком электронов. 1 Если делать съёмку при комнатной температуре, то электроны будут сильно повреждать молекулы, и это будет искажать получаемые данные. 1 Чтобы данные меньше искажались, образец замораживают. 1
- Обработка изображений. 3 На первом этапе учёные получают изображение большого количества хаотически расположенных частиц. 3 Затем компьютер классифицирует изображения и помещает похожие проекции в одну группу. 3 Из тысяч изображений в этой группе формируется одно двухмерное изображение высокого разрешения. 3
- Создание трёхмерной модели. 13 Из серии групповых изображений собирается трёхмерная модель высокого разрешения. 3
Криоэлектронная микроскопия позволяет наблюдать за образцами, которые не были окрашены или каким-либо образом зафиксированы, показывая их в родной среде. 45