Какие существуют методы выделения ДНК из клеток?

Некоторые методы выделения ДНК из клеток:

• Фенол-хлороформный метод. helicon.ru Клеточный лизат или гомогенат тканей обрабатывают фенолом, хлороформом и изоамиловым спиртом в пропорции 25:24:1. helicon.ru Фенол нужен для денатурации белков, включая нуклеазы, хлороформ растворяет жиры, а изоамиловый спирт уменьшает пенообразование и защищает хлороформ от окисления. helicon.ru Полученный двухфазный раствор интенсивно перемешивают, а затем центрифугируют для разделения фаз. helicon.ru В нижнюю (органическую) фазу попадают липиды и жирные кислоты, на границе раздела фаз оседают белки, а в верхней (водной) фазе остаются нуклеиновые кислоты. helicon.ru
• Метод с диоксидом кремния (силикой). inlab-genetics.ru К образцам добавляют гуанидинтиоцианат, соединения денатурируют, молекулы связывают с силикой, после чего происходит промывка, позволяющая избавиться от других компонентов. inlab-genetics.ru В последующем молекула превращается в раствор, пригодный для проведения исследований. inlab-genetics.ru
• Метод с ионообменными смолами. inlab-genetics.ru Исследуемый биоматериал помещается в пробирку со смолой, закипающей под действием высоких температур. inlab-genetics.ru После центрифугирования материал помещается на инкубацию в течение 30–40 минут. inlab-genetics.ru
• Метод с целлюлозными фильтрами. inlab-genetics.ru Специальная бумага, пропитанная веществами-буферами, связывает нуклеиновые кислоты, денатурирует белки и защищает образцы от ультрафиолета и нуклеаз. inlab-genetics.ru
• Метод с магнитными частицами. inlab-genetics.ru К исследуемому материалу добавляют магнитные шарики и особое лизирующее средство. inlab-genetics.ru Шарики «захватывают» выделившуюся ДНК, остаточные клеточные элементы вымываются в процессе очищения. inlab-genetics.ru
• Метод с фильтрационными гелями. inlab-genetics.ru Фильтрационные гели сформированы из поперечно расположенных гранул, напоминающих сито. inlab-genetics.ru При пропуске образцов через колонку с гелем вещества разделяются и проходят очистку этилом или фенол хлороформным средством. inlab-genetics.ru

Выбор метода зависит от качества материалов, количества времени, отведённого на анализы, цели экспертизы, объёма задач, ожидаемых результатов и дальнейшего применения полученных молекул. inlab-genetics.ru