Какие существуют методы детекции результатов ПЦР?

Некоторые методы детекции результатов ПЦР:

• Электрофорез в вязкой среде. 2 ДНК/РНК заряжены электрически и движутся к одному из электродов. 2 В среду (агар или полиакридный гель) добавляют краситель ДНК (например — бромистый этидий). 2 В процессе сеанса электрофореза молекулы нуклеиновых кислот движутся и формируют скопления, подкрашенные этидием. 2 Под ультрафиолетом это выглядит в виде полосок разной толщины и яркости. 2
• Метод гибридизации. 2 Используются праймеры, заранее помеченные люминофором (флуорофором). 2 После нужного числа температурных циклов применяют специальный прибор — детектор флюоресценции. 2 За счёт того, что в образец можно добавлять флуорофоры для разных мишеней (они будут светиться под ультрафиолетом разным цветом), метод гибридизации подходит для диагностики сразу нескольких мишеней в одном образце. 2
• ПЦР-диагностика в реальном времени (real-time PCR). 2 Отличается тем, что детекция проводится прямо в процессе амплификации. 2 Для этого нужны зонды-люминофоры и специальные приборы ДНК-амплификаторы. 2 Эти устройства оценивают нарастание яркости люминофора после каждого температурного цикла и впоследствии вычисляют исходное число искомых нуклеиновых кислот в образце. 2
• ПЦР с анализом результатов «по конечной точке» (End-point PCR). 3 Эта модификация позволяет учитывать результаты реакции по наличию флуоресценции после амплификации, не открывая пробирку. 3