Какие существуют методы детекции результатов ПЦР?

Некоторые методы детекции результатов ПЦР:

• Электрофорез в вязкой среде. www.labquest.ru ДНК/РНК заряжены электрически и движутся к одному из электродов. www.labquest.ru В среду (агар или полиакридный гель) добавляют краситель ДНК (например — бромистый этидий). www.labquest.ru В процессе сеанса электрофореза молекулы нуклеиновых кислот движутся и формируют скопления, подкрашенные этидием. www.labquest.ru Под ультрафиолетом это выглядит в виде полосок разной толщины и яркости. www.labquest.ru
• Метод гибридизации. www.labquest.ru Используются праймеры, заранее помеченные люминофором (флуорофором). www.labquest.ru После нужного числа температурных циклов применяют специальный прибор — детектор флюоресценции. www.labquest.ru За счёт того, что в образец можно добавлять флуорофоры для разных мишеней (они будут светиться под ультрафиолетом разным цветом), метод гибридизации подходит для диагностики сразу нескольких мишеней в одном образце. www.labquest.ru
• ПЦР-диагностика в реальном времени (real-time PCR). www.labquest.ru Отличается тем, что детекция проводится прямо в процессе амплификации. www.labquest.ru Для этого нужны зонды-люминофоры и специальные приборы ДНК-амплификаторы. www.labquest.ru Эти устройства оценивают нарастание яркости люминофора после каждого температурного цикла и впоследствии вычисляют исходное число искомых нуклеиновых кислот в образце. www.labquest.ru
• ПЦР с анализом результатов «по конечной точке» (End-point PCR). science-pedagogy.ru Эта модификация позволяет учитывать результаты реакции по наличию флуоресценции после амплификации, не открывая пробирку. science-pedagogy.ru