Какие существуют методы борьбы с контаминацией в научных исследованиях?

Некоторые методы борьбы с контаминацией в научных исследованиях:

• Использование фермента N-урацил-гликозилазы. elearning.volgmed.ru Фермент способен расщеплять молекулы ДНК со встроенным урацилом. elearning.volgmed.ru Если добавить его в реакционную смесь до амплификации, то попавшие в неё ампликоны будут разрушены. elearning.volgmed.ru
• Фотохимическое воздействие на молекулы ДНК. elearning.volgmed.ru Для этого используют псорален или изопсорален, которые активируются кратковременным облучением ультрафиолетовым светом. elearning.volgmed.ru Модифицированные этими соединениями молекулы ДНК не могут участвовать в реакции амплификации. elearning.volgmed.ru
• Уменьшение количества циклов реакции. elearning.volgmed.ru Например, до 25–30 циклов. elearning.volgmed.ru Но даже при таком подходе велик риск получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов. elearning.volgmed.ru
• Использование флуоресцентных методов детекции. elearning.volgmed.ru Они позволяют регистрировать результаты анализа, не открывая пробирки. elearning.volgmed.ru Тем самым исключается этап электрофореза — основной источник контаминации. elearning.volgmed.ru
• Периодическое облучение пространства. patents.google.com Для этого используют жёсткое УФ-излучение с длиной волны 254 нм. patents.google.com Такой тип излучения приводит к возникновению пиримидиновых димеров в молекулах нуклеиновых кислот, которые препятствуют продвижению ДНК-полимераз по матрицам РНК или ДНК. patents.google.com
• Обработка пола, рабочих поверхностей и посуды. patents.google.com Для этого используют раствор высоко реакционноспособного химического агента, например, хлорной извести или перекиси водорода с концентрацией до 30%. patents.google.com

Для уверенности в отсутствии контаминации каждую серию экспериментов сопровождают отрицательными контролями, а все реактивы хранят отдельными порциями. elearning.volgmed.ru