Некоторые принципы криоконсервации, используемые для сохранения клеток:
- Медленное замораживание (ММЗ). 1 Предполагает постепенную остановку метаболической активности в присутствии криопротекторов в низкой концентрации, что позволяет минимизировать цитотоксические эффекты последних. 1 Оптимальным режимом в отношении клеток млекопитающих является охлаждение на 1 °C в минуту. 1
- Витрификация. 12 Предполагает быстрое охлаждение биологического материала в среде, содержащей высокие концентрации криопротекторных агентов. 1 Основным преимуществом метода является предупреждение формирования льда, что помогает сохранить структурную организацию тканей и фрагментов органов как при заморозке, так и при оттаивании образца. 1
- Использование криопротекторов. 13 Это вещества, уменьшающие содержание внутрицеллюлярной воды и увеличивающие общую концентрацию растворённых веществ, что предупреждает повреждение клеток кристаллами льда путём повышения вязкости и образования водородных связей. 1 После размораживания необходимо удалить криопротекторы из клеток. 3
- Быстрое погружение биологического материала в жидкий азот. 1 Это позволяет минимизировать эффекты обезвоживания, делая внутри- и внеклеточную воду вязкой и предотвращая её переход в твёрдое агрегатное состояние. 1