Основные различия между способами фиксации гистологических образцов:
- Глубокое замораживание. 1 При этом методе осуществляют быструю заморозку до -180 градусов С, при этом происходит остановка всех жизненных процессов в тканях и стабилизация структур клеток. 1 При таком способе не образуется крупных кристаллов льда, способных повредить внутренние структуры. 1
- Химическая фиксация. 13 Происходят глубокие изменения в тканях на химическом и физическом уровнях. 1 Выбор фиксирующего раствора основывается на его преимуществах и недостатках для работы с конкретным видом материала и пригодностью для конкретного метода микроскопического исследования. 1
Некоторые типы фиксаторов и их особенности:
- Формалиновые. 13 Наиболее распространённый тип фиксирующего раствора. 3 Формалин хорошо проникает в ткани и может применяться для фиксации крупных объектов. 1 Недостаток формалиновых фиксаторов — излишнее уплотнение тканей, затрудняющее дальнейшую обработку и ухудшающее качество препарата. 1
- Спиртовые. 13 Для фиксации используют как 95% этиловый спирт, так и абсолютный, который меньше деформирует клетки. 1 Этиловый спирт слабее проникает в ткани по сравнению с формалином, поэтому лучше использовать кусочки ткани не толще 3–5 мм. 1 Продолжительность фиксации в спирте — от нескольких часов до суток. 1
- На основе пикриновой кислоты. 3 Объекты, зафиксированные смесями на основе пикриновой кислоты, неустойчивы в воде, поэтому после фиксации объект переносят в 70% спирт. 3 После фиксации объект приобретает жёлтую окраску, что обычно не мешает работе. 3
- Сулемовые. 3 Фиксирующие смеси на основе сулемы работают медленно. 3
- Осмиевая кислота. 3 Фиксаторы на основе осмиевой кислоты мало изменяют структуру тканей и клеток. 3 Окрашивают жиры в тёмный цвет. 3 В электронной микроскопии применяются в качестве контрастного вещества. 3 Чрезвычайная ядовитость и высокая цена ограничивают применение осмиевых фиксаторов. 3