Основные этапы процесса окрашивания замороженных срезов:
- Дофиксация. 2 Срезы дофиксируют в охлаждённом до -20 °С чистом ацетоне, метаноле или 4% нейтральном формальдегиде (в зависимости от дальнейшего метода окрашивания) в течение 10 минут с последующим высушиванием на воздухе до полного испарения фиксатора. 2
- Изготовление среза. 3 Срез толщиной менее 7 мкм из замороженной пластинки делают стандартным методом. 3
- Перенос на предметное стекло. 3 Срез немедленно помещают в спиртоальдегидный раствор при комнатной температуре (20–25 °С) на 3 минуты, затем отмывают проточной водой от фиксатора в течение 30 секунд и окрашивают гистологическими красителями обычным образом. 3
- Заключение под покровное стекло. 3 Окрашенные срезы заключают под покровное стекло в водорастворимую среду либо обезвоживают в органической среде и заключают в синтетическую органическую среду. 3
Для окрашивания замороженных срезов используют ускоренный протокол, который подбирается индивидуально в каждой лаборатории. 1