Какие основные этапы включает метод секвенирования ДНК по Максаму-Гилберту?

Метод секвенирования ДНК по Максаму-Гилберту включает следующие этапы: en.wikipedia.org

1. Радиоактивное мечение одного 5'-конца ДНК и очистка фрагмента ДНК, подлежащего секвенированию. en.wikipedia.org
2. Химическая обработка. en.wikipedia.org В каждой из четырёх реакций (G, A + G, C, C + T) происходит разрыв небольшой доли одного или двух из четырёх нуклеотидных оснований. en.wikipedia.org Концентрация модифицирующих химических веществ регулируется так, чтобы вносить в среднем одну модификацию на молекулу ДНК. en.wikipedia.org
3. Генерация серии меченых фрагментов. en.wikipedia.org В каждой молекуле образуется ряд меченых фрагментов, от меченого конца до первого «разрезанного» участка. en.wikipedia.org
4. Разделение фрагментов по размерам. en.wikipedia.org Фрагменты в четырёх реакциях электрофорезируют бок о бок в денатурирующих акриламидных гелях. en.wikipedia.org
5. Визуализация фрагментов. en.wikipedia.org Для этого гель подвергают воздействию рентгеновской плёнки для авторадиографии. en.wikipedia.org В результате получается серия тёмных полос, каждая из которых соответствует радиоактивно меченному фрагменту ДНК, по которому можно сделать вывод о последовательности. en.wikipedia.org

Сегодня метод секвенирования ДНК по Максаму-Гилберту используется редко, поскольку требует наличия токсичных реагентов и имеет сложности с автоматизацией. nebula.org