Какие методы используются для получения рекомбинантной амилазы в бактериях?

Для получения рекомбинантной амилазы в бактериях используют, например, следующие методы:

• Плазмидная экспрессия гена. biotechlink.org Ген синтезируют из олигонуклеотидов и клонируют в составе вектора под контролем промотора бактериофага. biotechlink.org Затем ген экспрессируют в клетках штамма, в результате чего получают рекомбинантный белок. biotechlink.org
• Интеграция гена в хромосомную ДНК. elib.bsu.by Копии кассеты, содержащей ген амилазы под контролем нативного промотора и ген селективного маркера, интегрируют в случайные участки хромосомной ДНК штамма с помощью гомологичной рекомбинации. elib.bsu.by
• Селекция на устойчивость к антибиотикам. elib.gsu.by Такой подход используют, чтобы получить мутации, изменяющие секрецию ферментов. elib.gsu.by
• Введение векторов с сильными промоторами. elib.gsu.by Это позволяет повысить продуктивность рекомбинантных микроорганизмов. elib.gsu.by

Для очистки рекомбинантной амилазы применяют ультрафильтрацию, осаждение солями, диализ и колоночную хроматографию. www.researchgate.net