Некоторые факторы, которые могут влиять на диффузное фоновое окрашивание в иммуногистохимических исследованиях:
- Качество срезов. 1 Неровные срезы, имеющие плохой контакт с предметным стеклом, окрашиваются неравномерно и имеют значительное фоновое окрашивание. 1
- Депарафинизация и распределение реагентов по срезу. 1 Неполная депарафинизация или неравномерное распределение реагентов на поверхности среза могут быть причиной неравномерного окрашивания препаратов. 1
- Стандартизация этапов промывки препаратов. 1 Интенсивность промывки препаратов, используемых разными лаборантами, может влиять на качество получаемых препаратов. 1
- Выбор антител для исследований. 1 Важно учитывать чувствительность и специфичность первичных антител, а также оптимальность клона антитела. 1
- Использование неэффективного протеинового блока. 1 Это может привести к диффузному фоновому окрашиванию препарата. 1
- Активность эндогенных ферментов. 5 Например, при использовании в качестве ферментов для иммуногистохимической реакции пероксидазы хрена или щелочной фосфатазы в некоторых случаях можно наблюдать чрезмерное фоновое окрашивание, связанное с эндогенной активностью ферментов. 5