Как влияет температура на процесс амплификации ДНК в ПЦР?

Температура влияет на процесс амплификации ДНК в ПЦР, обеспечивая переход от одной стадии реакции к другой. medlink.ucoz.ru

Каждый цикл амплификации состоит из трёх этапов с различными температурными режимами: natural-sciences.ru

1. Денатурация ДНК. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru Происходит при нагревании раствора до 93–95 °С в течение 30–40 секунд. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru
2. Отжиг праймеров. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru Происходит при 50–65 °С. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru Для каждой пары праймеров существует своя температура отжига. medlink.ucoz.ru
3. Достраивание цепей ДНК. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru Проходит при температуре 70–72 °С. medlink.ucoz.ru natural-sciences.ru Это температура оптимальной активности фермента ДНК-полимеразы. natural-sciences.ru

Более низкие температуры ниже оптимальной температуры отжига (50–65 °C) приводят к нецелевым модификациям, например, к неспецифическим амплификациям, при которых праймеры будут неспецифично связываться с нуклеиновой кислотой. en.wikipedia.org

Высокая температура, в свою очередь, оказывает повреждающее действие на ДНК-полимеразу, снижая её активность. medlink.ucoz.ru

Процесс амплификации проводится в специально программируемом термостате — амплификаторе, который по заданной программе автоматически осуществляет смену температур и временных интервалов. natural-sciences.ru