Как система рестрикции и модификации используется в генной инженерии?

Система рестрикции и модификации используется в генной инженерии для расщепления длинных цепей ДНК на более короткие фрагменты. moodle.kstu.ru

В этом процессе применяют рестриктазы — ферменты, которые узнают специфическую последовательность ДНК (4–10 нуклеотидов) и расщепляют двойную цепь ДНК с 3’- или 5’-конца от сайта узнавания. moodle.kstu.ru

Некоторые этапы использования системы рестрикции и модификации в генной инженерии:

1. Получение индивидуального гена из какого-либо организма. foxford.ru Из него выделяют всю хромосомную ДНК и расщепляют её одной или двумя рестриктазами. foxford.ru Ферменты подбирают так, чтобы они не разрезали интересующий ген, а делали разрывы по его краям. foxford.ru
2. Молекулярное клонирование. foxford.ru Используют две молекулы ДНК — вставку, содержащую интересующий ген, и вектор — ДНК, выступающую в роли носителя. foxford.ru Вставку «вшивают» в вектор при помощи ферментов, получая новую, рекомбинантную молекулу ДНК. foxford.ru
3. Внедрение рекомбинантной молекулы в клетки. foxford.ru Затем эту молекулу внедряют в клетки-хозяева, и эти клетки образуют колонии на питательной среде. foxford.ru

Таким образом, с помощью системы рестрикции и модификации удаётся объединить фрагменты двух разных ДНК и получить индивидуальные гены, которые можно ввести в клетки для синтеза закодированного в гене белка. foxford.ru