Расшифровка генома человека с помощью молекулярной биологии включает несколько этапов: nplus1.ru
- Выделение ДНК. news.itmo.ru Биологический материал для этого может быть разнообразным, так как ДНК содержится почти во всех клетках организма. news.itmo.ru Процесс выделения состоит из четырёх этапов: разрушение мембраны клеток для высвобождения ДНК, очистка от связанных с ДНК белков, очистка от разного рода примесей и растворение ДНК для хранения. news.itmo.ru
- Определение последовательности ДНК. nplus1.ru Для этого используют метод Сэнгера, основанный на ферментативной достройке второй цепи на матрице цепочки, которую необходимо прочитать. nplus1.ru Синтез комплементарной цепи происходит с использованием стандартных нуклеотидов (A, T, G, C), но в определённый момент в пробирку добавляют радиоактивно меченый дидезоксинуклеотид, после встройки которого синтез цепи обрывается. nplus1.ru Анализ в геле получившихся фрагментов разных размеров, оканчивающихся на одну и ту же «букву», позволяет восстановить всю нуклеотидную последовательность. nplus1.ru
- Составление физических карт хромосом. nplus1.ru Это делается путём клонирования в генетические вектора перекрывающихся кусков генома размером десятки и сотни тысяч пар и расставления на них известных генетических маркеров, по которым эти куски можно было сопоставлять. nplus1.ru
После того как будут определены последовательности каждого фрагмента, в действие вводят сложнейшие компьютерные программы, заново собирающие исходную последовательность. elementy.ru