Как работает принцип окрашивания бактерий по Граму?

Принцип окрашивания бактерий по Граму основан на различиях в химическом составе и строении клеточной стенки. moodle.kstu.ru В результате окрашивания по Граму грамположительные бактерии приобретают фиолетовый цвет, а грамотрицательные — от розового до красного. bigenc.ru

Процесс окрашивания включает несколько этапов: bigenc.ru

1. На фиксированный на предметном стекле мазок наносят кристаллический фиолетовый краситель. bigenc.ru Через 10–30 секунд излишки смывают водой. bigenc.ru
2. На мазок наносят раствор йода на 10–30 секунд. bigenc.ru Этот шаг известен как «фиксация красителя». bigenc.ru Раствор йода сливают, предметное стекло промывают проточной водой. bigenc.ru
3. Добавляют обесцвечивающее вещество, часто это смешанный растворитель из этанола и ацетона. bigenc.ru Предметное стекло промывают водой в течение 5 секунд. bigenc.ru
4. На этапе контрастного окрашивания мазок докрашивают основным раствором фуксина в течение 40–60 секунд. bigenc.ru Раствор фуксина смывают водой, избыток воды промокают салфеткой, а предметное стекло сушат на воздухе. bigenc.ru

Почему бактерии окрашиваются по-разному: dzen.ru

• У грамположительных бактерий толстый муреиновый слой, с компонентами которого и связывается фиолетовый краситель. dzen.ru
• У грамотрицательных бактерий муреиновый слой гораздо тоньше, да ещё и поверх него располагается наружная мембрана. dzen.ru Наружная мембрана мешает окрашиванию и так тонкой клеточной стенки, потому она и не способна связаться с фиолетовым красителем. dzen.ru

В результате окрашивания по Граму грамположительные бактерии становятся фиолетовыми, а грамотрицательные — розовыми. bigenc.ru dzen.ru