Как работает полимеразная цепная реакция (ПЦР)?

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет многократно копировать молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие генетическую информацию определённого патогена. gemotest.ru

Процесс состоит из трёх основных этапов: gemotest.ru

1. Денатурация. gemotest.ru unclinic.ru Пробу нагревают, и все ДНК-молекулы, которые есть в биоматериале, распадаются на две нити РНК. gemotest.ru Если генетический материал патогена — РНК, а не ДНК, то перед денатурацией проводят ПЦР с обратной транскрипцией, чтобы превратить РНК в ДНК-молекулу. gemotest.ru
2. Отжиг. gemotest.ru Температуру снижают. gemotest.ru Если в пробе есть целевая ДНК, праймеры присоединяются к концам двух её нитей — так происходит отжиг. gemotest.ru
3. Элонгация. gemotest.ru После отжига фермент ДНК-полимераза активируется и начинает достраивать вторую нить ДНК, начиная от праймера. gemotest.ru Для восстановления цепи ДНК полимераза использует дНТФ. gemotest.ru

При проведении ПЦР выполняют более 30 циклов копирования (амплификации). gemotest.ru В результате каждого цикла количество ДНК-цепей удваивается. gemotest.ru Так, если на первом цикле было 2 цепи ДНК, на втором их будет уже 4, а на третьем — 8, и так далее. gemotest.ru

Для проведения ПЦР используется специальный прибор — амплификатор, который поддерживает необходимую для каждого этапа температуру и проводит циклы копирования ДНК. gemotest.ru Когда молекул становится достаточно для распознавания, оборудование анализирует их, а затем выдаёт качественный или количественный результат. gemotest.ru