Как работает электрофорез в полиакриламидном геле?

Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ) основан на движении заряженных биологических макромолекул в постоянном электрическом поле. docs.nevacert.ru ru.ruwiki.ru

Процесс происходит так: гель устанавливают вертикально между анодным и катодным буферными резервуарами, с помощью гребенки создают лунки, в которые наносят образцы. www.dia-m.ru Для визуализации движения фрагментов в образцы добавляют краситель. www.dia-m.ru

Электрическое поле, создаваемое двумя электродами — анодом и катодом, проходя через гель, задает движение молекул белков и нуклеиновых кислот к аноду. www.dia-m.ru

На подвижность макромолекул в геле влияют разные факторы, основными из них являются: www.dia-m.ru

• Заряд. www.dia-m.ru При увеличении суммарного заряда возрастает подвижность молекул. www.dia-m.ru
• Размеры. www.dia-m.ru Проходя через гель, более крупные молекулы задерживаются в порах геля, меньшие — более подвижные, проходят дальше. www.dia-m.ru
• Форма. www.dia-m.ru При наличии одного и того же размера, но разной формы, молекулы будут иметь разную подвижность. www.dia-m.ru
• Размер пор ПААГ. www.dia-m.ru Молекулярное сито полиакриламидного геля задаёт скорость движения молекул в зависимости от размера пор. www.dia-m.ru Чем меньше поры, тем медленнее движутся в нём крупные молекулы в отличие от мелких. www.dia-m.ru

По окончании проведения электрофореза для визуализации разделённых фрагментов гель извлекают из камеры и проводят окраску специальными красителями. www.dia-m.ru

Электрофорез в ПААГ — метод молекулярной биологии и биохимии, используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот. ru.ruwiki.ru