Как работает амплификатор ДНК с регистрацией результатов в режиме реального времени?

Принцип работы амплификатора ДНК с регистрацией результатов в режиме реального времени основан на измерении флуоресцентного сигнала, который испускается в ходе полимеразной цепной реакции (ПЦР) под воздействием излучения возбуждения в каждом цикле температурно-кинетической амплификации молекул ДНК. www.ktopoverit.ru all-pribors.ru

Анализируемый образец загружается в одноразовый картридж, который затем помещается в систему термоциклирования. www.ktopoverit.ru all-pribors.ru Для циклического нагрева и охлаждения рабочей зоны картриджа используются плоский керамический нагреватель и система жидкостного охлаждения. www.ktopoverit.ru all-pribors.ru Картридж с тестируемой жидкостью во время амплификации находится в непосредственном контакте с поверхностью нагревателя. www.ktopoverit.ru all-pribors.ru

Каждый этап амплификации состоит из трёх шагов: eltemiks-lab.ru

1. Денатурация. eltemiks-lab.ru Уничтожение связей водорода между молекулами, чтобы двухцепочечные молекулы стали двумя одноцепочечными. eltemiks-lab.ru В этот период амплификатор нагревается до температуры 94–98 °С. eltemiks-lab.ru
2. Отжиг или присоединение праймеров. eltemiks-lab.ru Подбранные специально для реакции короткие фрагменты ДНК, которые дополняют участки ДНК образца, в результате чего начинается новый синтез. eltemiks-lab.ru Температура при этом снижается до 40–75 °С. eltemiks-lab.ru
3. Элонгация. eltemiks-lab.ru Синтез новой цепочки ДНК, происходит процедура при температуре 60–75 °С. eltemiks-lab.ru

Амплификатор следит за копированием и накоплением участка нуклеиновой кислоты, так как эти процессы важны для точной работы прибора. eltemiks-lab.ru Во время этого процесса прибором строится график, показывающий зависимость флуоресценции от номера цикла, что напрямую отражает результаты исследования. eltemiks-lab.ru