Сборка кинетохора в процессе клеточного деления происходит следующим образом: 4

1. Кинетохора прикрепляется к центромере — участку хромосомы. 4 Центромера действует как якорь для кинетохоры и соединяет все части структуры. 4
2. Кинетохора захватывает микротрубочки, отходящие от структур, называемых полюсами веретена. 4 Для этого используется набор белков, которые просматривают огромное количество микротрубочек, пока не найдут ту, которая соответствует конкретной конфигурации кинетохоры. 4
3. Как только кинетохора идентифицирует совместимую микротрубочку, она крепко зацепляется за неё благодаря серии химических взаимодействий между белками в кинетохоре и белками в микротрубочках. 4
4. Чтобы обеспечить стабильность и предотвратить любые неудачи, кинетохора образует несколько соединений с микротрубочкой. 4 Эти соединения гарантируют, что кинетохора остаётся прочно закреплённой и способна противостоять любым рывкам или натяжениям во время клеточного деления. 4

В процессе метафазы к каждому кинетохору присоединяется порядка 10–40 микротрубочек, которые образуют кинетохорный пучок. 2 Все хромосомы оказываются связанными с противоположными полюсами деления и собираются в метафазную пластинку в центре веретена. 2