Как происходит процесс отбора колоний бактерий с рекомбинантной плазмидой?

Процесс отбора колоний бактерий с рекомбинантной плазмидой основан на использовании устойчивости штамма к антибиотику, которая кодируется маркерным геном на рекомбинантной плазмиде. kpfu.ru

Процедура включает следующие этапы: yandex.ru

1. Клетки, трансформированные рекомбинантными молекулами ДНК, высевают на две чашки Петри с твёрдой питательной средой, каждая из которых содержит один из антибиотиков. yandex.ru
2. Бактериальные клетки выращивают в течение 12–24 часов. yandex.ru
3. Сравнивают результаты роста на обеих чашках и отбирают те клоны микроорганизмов, которые способны расти только на среде с одним из антибиотиков. yandex.ru

Ещё один способ отбора предполагает использование ультрафиолетового облучения. yandex.ru Перед инкубацией микробные клетки подвергают этому воздействию, а клоны микроорганизмов отбирают с того места контроля, где клетки опыта погибли. yandex.ru

Для отбора целевых рекомбинантных клонов также применяют рестриктный анализ плазмидной ДНК или скрининг бактериальных колоний методом ПЦР. evrogen.ru