Процесс окрашивания эндоспор в бактериологии происходит следующим образом: 1
- С целью разрыхления оболочки эндоспор окрашивание мазков проводят сильным красителем при нагревании. 1
- Затем цитоплазму обесцвечивают и дополнительно красят в контрастный цвет. 1
Например, для окрашивания по методу Пешкова: 1
- Приготовленный тонкий мазок 2–3-суточной культуры бактерий фиксируют на пламени горелки или смесью 5 частей 40% формалина и 95 частей 96% этанола в течение 15 минут. 1
- После фиксации мазок заливают метиленовым синим по Лѐффлеру и доводят до кипения, держа предметное стекло над пламенем горелки. 1 Продолжительность окрашивания — 10–20 секунд. 1 По мере испарения добавляют новые порции краски. 1
- Препарат тщательно промывают водой в течение 30 секунд. 1
- Препарат докрашивают 0,5% водным раствором нейтрального красного. 1
- Вновь промывают водой, высушивают на воздухе или промокают воду фильтровальной бумагой. 1
- Микроскопируют с иммерсией. 1
Для окрашивания по методу Шеффера-Фултона: 5
- Образец высушивают на воздухе на предметном стекле, фиксируют нагреванием. 5
- Покрывают промокательной бумагой или бумажной салфеткой, пропитанной до насыщения красителем, и помещают на 5 минут над кипящей водой. 5
- Стекло промывают водопроводной водой, и мазок дополнительно окрашивают 30 секунд сафранином, как при окраске по Граму. 5
- Затем вновь промывают и подсушивают мазок промокательной бумагой. 5
В результате окрашивания методом Пешкова зрелые эндоспоры приобретают голубой цвет, молодые — тёмно-синий, цитоплазма — красный цвет, зёрна хроматина — фиолетовый цвет. 3