Как происходит процесс амплификации ДНК в полимеразной цепной реакции?

Процесс амплификации ДНК в полимеразной цепной реакции (ПЦР) происходит в несколько циклов, каждый из которых состоит из трёх этапов с различными температурными режимами: 34

1. Денатурация. 15 Пробу нагревают, и все ДНК-молекулы, которые есть в биоматериале, распадаются на две нити РНК. 5 Этот процесс происходит при температуре 93–95 °С в течение 30–40 секунд. 34
2. Отжиг праймеров. 34 Праймеры присоединяются к соответствующим последовательностям на границе специфического участка при температуре 50–65 °С. 34 Время отжига составляет от 20 до 60 секунд. 3
3. Достраивание цепей ДНК. 4 Происходит при температуре 70–72 °С, это температура оптимальной активности фермента ДНК-полимеразы. 34 На этом этапе происходит достраивание цепей праймеров. 3

В результате каждого цикла количество ДНК-цепей удваивается. 5 Так, если на первом цикле было 2 цепи ДНК, на втором их будет уже 4, а на третьем — 8, и так далее. 5

Обычно процесс амплификации включает 30–40 циклов. 3 Для проведения ПЦР используется специальный прибор — амплификатор, который по заданной программе автоматически осуществляет смену температур и временных интервалов. 3