Процесс амплификации ДНК в полимеразной цепной реакции (ПЦР) происходит в несколько циклов, каждый из которых состоит из трёх этапов с различными температурными режимами: natural-sciences.ru medlink.ucoz.ru
- Денатурация. docs.nevacert.ru gemotest.ru Пробу нагревают, и все ДНК-молекулы, которые есть в биоматериале, распадаются на две нити РНК. gemotest.ru Этот процесс происходит при температуре 93–95 °С в течение 30–40 секунд. natural-sciences.ru medlink.ucoz.ru
- Отжиг праймеров. natural-sciences.ru medlink.ucoz.ru Праймеры присоединяются к соответствующим последовательностям на границе специфического участка при температуре 50–65 °С. natural-sciences.ru medlink.ucoz.ru Время отжига составляет от 20 до 60 секунд. natural-sciences.ru
- Достраивание цепей ДНК. medlink.ucoz.ru Происходит при температуре 70–72 °С, это температура оптимальной активности фермента ДНК-полимеразы. natural-sciences.ru medlink.ucoz.ru На этом этапе происходит достраивание цепей праймеров. natural-sciences.ru
В результате каждого цикла количество ДНК-цепей удваивается. gemotest.ru Так, если на первом цикле было 2 цепи ДНК, на втором их будет уже 4, а на третьем — 8, и так далее. gemotest.ru
Обычно процесс амплификации включает 30–40 циклов. natural-sciences.ru Для проведения ПЦР используется специальный прибор — амплификатор, который по заданной программе автоматически осуществляет смену температур и временных интервалов. natural-sciences.ru