Как происходит окрашивание клеточных стенок бактерий по методу Грама?

Окрашивание клеточных стенок бактерий по методу Грама происходит в несколько этапов: bigenc.ru

1. На фиксированный на предметном стекле мазок наносят кристаллический фиолетовый краситель. bigenc.ru Через 10–30 секунд излишки красителя смывают водой. bigenc.ru
2. На мазок наносят раствор йода на 10–30 секунд. bigenc.ru Этот шаг известен как «фиксация красителя». bigenc.ru Раствор йода сливают, предметное стекло промывают проточной водой. bigenc.ru
3. Добавляют обесцвечивающее вещество, часто это смешанный растворитель из этанола и ацетона. bigenc.ru Предметное стекло промывают водой в течение 5 секунд. bigenc.ru
4. На этапе контрастного окрашивания мазок докрашивают основным раствором фуксина в течение 40–60 секунд. bigenc.ru Раствор фуксина смывают водой, избыток воды промокают салфеткой, а предметное стекло сушат на воздухе. bigenc.ru

Бактерии окрашиваются по-разному в зависимости от строения их клеточной стенки. dzen.ru У грамположительных бактерий толстый муреиновый слой, с компонентами которого и связывается фиолетовый краситель. dzen.ru У грамотрицательных бактерий муреиновый слой гораздо тоньше, да ещё и поверх него располагается наружная мембрана. dzen.ru Наружная мембрана мешает окрашиванию и так тонкой клеточной стенки, потому она и не способна связаться с фиолетовым красителем. dzen.ru

По завершении окрашивания по Граму грамположительные клетки становятся фиолетовыми, а грамотрицательные — от розового до красного. bigenc.ru