Правильно подобранные праймеры обеспечивают специфичность и чувствительность тест-системы, что важно для точности генетических исследований. elib.osu.ru dna-technology.ru
Некоторые аспекты влияния праймеров на точность:
- Специфичность. dna-technology.ru При недостаточной специфичности праймеров в процессе ПЦР образуются продукты, которые могут быть идентифицированы как ложноположительный результат. dna-technology.ru Кроме того, на процессы их накопления расходуются компоненты реакционной смеси, что приводит к потере чувствительности реакции. dna-technology.ru
- Отсутствие димеров и петель. dna-technology.ru ru.wikipedia.org Если праймеры образуют устойчивые двойные цепи, это может повлиять на точность исследования. dna-technology.ru
- Расположение области отжига. dna-technology.ru Она должна находиться вне зон мутаций, делеций или инсерций. dna-technology.ru Если праймеры попадают в такую зону, не происходит отжиг, и возникает ложноотрицательный результат. dna-technology.ru
Для повышения точности используют два набора праймеров: первый — для амплификации более длинного фрагмента, второй — для амплификации внутреннего участка этого фрагмента. biomolecula.ru Несколько раундов ПЦР проводят с первым набором, а затем добавляют второй. biomolecula.ru