Как окрашиваются кислотоустойчивые бактерии по методу Леффлера?

Метод окрашивания кислотоустойчивых бактерий с использованием метиленового синего Леффлера включает следующие этапы: medixlab.ru

1. На срезы наносят основной фуксин и выдерживают в течение 20–30 минут, если нет специальных указаний от исследователя. medixlab.ru Затем срезы промывают в деионизированной или дистиллированной воде 1 минуту. medixlab.ru
2. Дают стечь избытку воды со среза, наносят дифференцирующий раствор на 5–30 секунд. medixlab.ru Срез должен практически полностью обесцветиться. medixlab.ru Затем срезы промывают в 2 сменах проточной воды по 1 минуте в каждой и в деионизированной или дистиллированной воде 1 минуту. medixlab.ru
3. Дают стечь избытку воды со среза, кладут стёкла срезами вверх и наносят метиленовый синий Леффлера так, чтобы краситель выходил за пределы среза (обычно достаточно 3–5 капель для одного среза). medixlab.ru Затем выдерживают 30 секунд. medixlab.ru
4. Смывают избыток красителя в деионизированной или дистиллированной воде. medixlab.ru
5. Обезводят, просветляют и заключают препарат. medixlab.ru

При строгом соблюдении режима окраски кислотоустойчивые клетки приобретают красный цвет, а некислотоустойчивые — синий. ib.vlsu.ru