Как метод хроматографии используется для разделения растительных пигментов?

Метод хроматографии используется для разделения растительных пигментов на основе различий в скорости движения пигментов в растворителе (подвижной фазы по неподвижной фазе). bio-ege.sdamgia.ru

Принцип метода состоит в том, что молекулы хлорофилла разного размера и разной окраски при пропитывании бумаги или слоя мела в стеклянной трубке перемещаются под воздействием растворителя с разной скоростью. molbiol.kirov.ru

Например, при тонкослойной хроматографии на бумаге на полоске бумаги чертят горизонтальную линию старта на расстоянии 4 см от края. molbiol.kirov.ru Из ранее приготовленной вытяжки берут стеклянной палочкой или капилляром небольшую порцию экстракта и переносят её многократно на стартовую линию хроматографической бумаги в виде полоски или пятна диаметром не более 1 см. molbiol.kirov.ru Бумагу подсушивают на воздухе, и нанесение повторяют 5–6 раз, чтобы сконцентрировать пигмент и не допустить образования большого пятна. molbiol.kirov.ru

Далее в сосуд или цилиндр с растворителем (например, бензином) на дне опускают хроматограмму стартовой линией вниз, так, чтобы бумага слегка касалась растворителя, и плотно закрывают пробкой. molbiol.kirov.ru Сосуд должен быть насыщен растворителем, который, поднимаясь вверх по хроматографической бумаге, увлекает за собой смесь пигментов. molbiol.kirov.ru

По окончании разделения пигментов хроматограмму вынимают, сразу же отмечают границу подъёма растворителя. molbiol.kirov.ru В результате пигменты распределяются в следующем порядке: первым снизу адсорбируется хлорофилл b жёлто-зелёного цвета, затем сине-зелёная зона хлорофилла а, выше ксантофилл, каротин очень быстро движется и располагается вверху полоски хроматографической бумаги у фронта растворителя. molbiol.kirov.ru