Криопротекторы используются для сохранения эмбрионов и других биологических образцов путём предотвращения образования микрокристаллов льда в клетках. 4
Процесс криоконсервации эмбрионов с использованием криопротекторов происходит в несколько этапов: 4
- Преэквилибрация. 4 На подготовительной стадии вода в клетках эмбрионов замещается на криопротектор, роль которых выполняют этиленгликоль и диметилсульфоксид. 4 Чтобы эти вещества полностью вытеснили воду, зародыши помещаются в них на 15 минут. 4 Затем эмбрионы погружаются в сахарозу, выполняющую функцию непроникающего криопротектора. 4
- Заморозка. 4 Зародыши, «пропитанные» криопротекторами, помещаются на носитель — полимерную или стеклянную трубку. 4 Затем эмбрион помещается в криохранилище с жидким азотом, где в течение нескольких секунд охлаждается до -198 °С. 4
Криопротекторы бывают двух категорий: 5
- Проникающие. 5 Обладают низкой молекулярной массой, которая понижает температуру замерзания. 5 К ним относятся глицерин, этиленгликоль, пропиленгликоль и диметилсульфоксид. 5
- Непроникающие. 5 Используются при осмотическом сжатии клеток перед заморозкой, контролируют регидратацию при размораживании. 5 Самым распространённым непроникающим криопротектором служит сахароза. 5
Также криопротекторы стабилизируют структуру плазмолеммы, сводя к минимуму потерю веществ, растворённых в воде, уходящей из клетки вследствие дегидратации. 2