Как используется метод ДНК-зондов для детекции вирусной ДНК в биологических материалах?

Метод ДНК-зондов основан на способности вирусной нуклеиновой кислоты после разделения цепей образовывать двойную цепь с предварительно помеченной молекулой нуклеиновой кислоты. scienceforum.ru www.activestudy.info

Процесс включает несколько этапов: scienceforum.ru

1. Получение ДНК-зонда. scienceforum.ru Для каждого вида вируса зонд готовят заранее и вводят в него метку, например, в виде атомов радиоактивного фосфора или биотина. scienceforum.ru www.activestudy.info
2. Выделение нуклеиновых кислот из исследуемого материала и их денатурация (расплетение двухцепочных молекул на одноцепочные). scienceforum.ru www.activestudy.info
3. Контакт образовавшихся одноцепочных молекул ДНК (или РНК) с ДНК-зондом при 55–65 °С, что приводит к образованию двухцепочных молекул (молекулярная гибридизация). scienceforum.ru www.activestudy.info
4. Удаление всех негибридизированных одноцепочных молекул нуклеиновых кислот. scienceforum.ru www.activestudy.info
5. Обнаружение (по метке) образовавшихся двухцепочных молекул нуклеиновых кислот, которые указывают на наличие в материале того вируса, на который был получен ДНК-зонд. scienceforum.ru www.activestudy.info

Некоторые достоинства метода: высокая чувствительность и специфичность, быстрота анализа, универсальность. www.activestudy.info Недостатки: относительная технологическая сложность и трудность получения ДНК-зонда. scienceforum.ru www.activestudy.info