Как эндонуклеазы рестрикции используются в генной инженерии и биотехнологии?

Эндонуклеазы рестрикции используются в генной инженерии и биотехнологии для расщепления длинных цепей ДНК на более короткие фрагменты. 3 Фермент узнаёт специфическую последовательность ДНК (4–10 нуклеотидов) и расщепляет двойную цепь ДНК с 3’- или 5’-конца от сайта узнавания. 3

Некоторые области применения эндонуклеаз рестрикции:

• Генная инженерия. 1 Геном организма-хозяина можно изменить, и благодаря активности эндонуклеазы можно ввести интересные последовательности. 1 В результате организм-хозяин производит желаемый генный продукт. 1
• Картирование ДНК. 1 Этот метод позволяет получать фрагменты ДНК различных размеров путём расщепления ДНК последовательностью ферментов рестрикции. 1 Используя электрофорез в агарозном геле для разделения полученных фрагментов, можно рассчитать расстояние между сайтами фермента рестрикции и определить структуру фрагмента ДНК. 1
• Секвенирование генов. 1 Включает в себя переваривание большой молекулы ДНК с помощью ферментов рестрикции, а затем прогонку полученных фрагментов через ДНК-секвенатор для определения нуклеотидной последовательности. 1
• Исследования экспрессии генов, мутаций и популяционных полиморфизмов. 1